高黎贡山羊肚菌的分子鉴定技术

高黎贡山的羊肚菌资源丰富, 但相关的研究几乎尚属空白。

在高黎贡山不同海拔地区开展羊肚菌资源调查, 并进行菌种分离纯化, 结合形态特征和核糖体DNA转录间隔区 (ITS) 序列分析来进行分类鉴定。

结果表明:从高黎贡山低海拔的潞江坝 (1 065 m) 到高海拔的贡山 (2 850 m) 都有羊肚菌的分布, 芒宽常绿阔叶林山地陡坡芭蕉树下和潞江坝坝弯农田边龙舌兰丛下采集的材料属于黄色羊肚菌分支, 贡山针叶林落叶松下采集的材料属于黑色羊肚菌分支, 百花岭常绿阔叶林杜鹃树下采集的材料与羊肚菌形态相似, 是鹿花菌属的假羊肚菌。用来自于高黎贡山4个采集地羊肚菌菌株 (BHL、GS、MK和BW) 的菌丝提取基因组DNA, 并进行ITS测序。

将各菌株的ITS序列与已知的30条羊肚菌属ITS序列和1条鹿花菌属ITS序列进行同源性比对, 采用MEGA6.0构建ML分析系统发育树 。35条序列聚类到4组, 分别为黄色羊肚菌组 (Esculenta clade) 、黑色羊肚菌组 (Elata clade) 、变红羊肚菌组 (Rufobrunnea Clade) 和鹿花菌组 (Gyromitra clade) , 羊肚菌的分组与前人的报道[3-4]一致。其中, 芒宽和潞江坝坝弯采集材料聚类到Esculenta clade, 与mes-22聚在一起;贡山采集材料聚类到Elata clade, 与mel-22聚在一起;百花岭采集材料聚类到Gyromitra clade, 与鹿花菌属的假羊肚菌Gyromitra esculenta聚在一起。