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1.1.1 菌种 粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）LL-413菌株，从家蚕（Bombyx mori）肠道内分离，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC M2015780。
1.1.2 试剂与仪器 酪蛋白：生物试剂，百奥莱生物试品有限公司；酪氨酸：生物试剂，生工生物工程（上海）股份有限公司；福林酚试剂：分析纯，上海沪试化工有限公司；以及其他普通分析纯试剂或生物试剂。 紫外-可见分光光度计：UV2600型，尤尼柯（上海）仪器有限公司；立式压力蒸汽灭菌器：LS-B50L型，上海华线医用核子仪器有限公司；生化培养箱：SPX-250B型，上海博迅实业有限公司；恒温培养摇床：HWY-2112型，上海智城分析仪器制造有限公司；微波炉：G8023CTL-K3型，中山格兰仕家用电器有限公司。 1.1.3培养基 平板培养基（g/L）：麦芽浸粉12.2，牛肉膏6.6，酵母浸出粉11.0，NaCl 5.0，MgSO4·7H2O 1.0，琼脂20.0，pH 8.0，121℃高压蒸汽灭菌20 min。种子和产酶培养基除不加琼脂外，其他成分同平板培养基，250 mL三角瓶装50 mL种子或产酶培养基，8层纱布扎口，121℃蒸汽灭菌20 min。
1.2 方法 1.2.1 酶活的测定 采用Folin-酚法测定舍雷肽酶的活力。发酵液离心后，上清液经过适当倍数稀释，取1 mL酶液和1 mL酪蛋白溶液（20 g/L，pH 8.0的Tris-HCl缓冲液配制）于试管中，充分混合后于37℃水浴中保温10 min，再加入2 mL的三氯乙酸（TCA，0.4 mol/L）终止反应，继续水浴保温20 min，经8 000 g离心5 min。取1 mL上清液，加入5 mL的Na2CO3（0.4 mol/L）和1 mL福林酚试剂，37℃水浴保温显色30 min，以TCA灭活的酶液的相同处理为参比，测定A660，依据酪氨酸浓度-A660标准曲线计算出酶解液中酪氨酸浓度，再按舍雷肽酶的活力定义计算发酵液中舍雷肽酶的活力。舍雷肽酶活力的定义：在37℃反应条件下，1 min水解浓度20 g/L酪蛋白产生1 μg酪氨酸的所需的酶量（mL）为一个酶活力单位（U/mL）。 1.2.2 菌种诱变 菌悬液的制备：取培养至对数生长期（16 h）的培养液1 mL，离心收集菌体，加入等量无菌生理盐水重悬菌体，再次离心收集菌体，重复2次。用100 mL无菌生理盐水重悬菌体于三角瓶中，加入1根无菌回形针于磁力搅拌器上搅拌20 min后备用。 紫外线诱变[9]：直径9 cm无菌培养皿7副，分别加入制备好的菌悬液2 mL。打开培养皿盖，在距离15 W紫外灯30 cm处边搅拌边照射，分别照射0、40、60、80、100、120、140 s。完毕后将各菌液用生理盐水稀释至103~105倍，取0.1 mL稀释菌液涂布平板，平板黑布包裹于30℃下培养24 h。 微波诱变[10]：微波炉高火预热和杀菌消毒5 min，5 mL菌悬液于试管中，试管于冰水浴中，在微波炉800 W的功率下处理0、40、60、80、100、120、140 s。完毕后将各菌液用生理盐水稀释103~105倍，取0.1 mL稀释菌液涂布平板，于30℃培养24 h。 1.2.3 菌株的初筛与复筛 初筛：选取致死率90％以上的平板，挑取菌落转接平板培养24 h后，挑取菌体接种产酶培养基（不做重复样），30℃、200 r/min培养24 h，发酵液4℃、8000 g离心5 min，测定上清液舍雷肽酶活力。 复筛：接种初筛获得的菌株菌体至种子培养基中，30℃、200 r/min培养24 h后，按5%的体积比接入产酶培养基，培养24 h后测定舍雷肽酶的活力，每个菌株做3个重复。 1.2.4 传代稳定性试验 将诱变后的菌株以及原始菌株LL-413在平板培养基上传代培养，每代菌体都经过种子扩培和产酶培养（3个重复），测定产酶活力，传代4次。
